凍存袋實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備

生長(zhǎng)良好之培養(yǎng)細(xì)胞、新鮮培養(yǎng)基、DMSO、無(wú)菌塑料冷凍保存管(Nalgene 5000-0020)、等速降溫機(jī)

冷凍方法理論準(zhǔn)備:

(1)傳統(tǒng)方法:冷存管置于4℃10分鐘--->-20℃30分鐘--->-8O℃16~18小時(shí)(或隔夜)--->液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止胞內(nèi)冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量消失，CS250凍存袋代理，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-8O℃冰箱中。

(2）程序降溫:利用已設(shè)定程序的等速降溫機(jī)以-1~-3℃/分鐘之速度由室溫降至（-8o℃以下) -120℃，200-074-401凍存袋代理，再放在液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。適用于懸浮型細(xì)胞與hybridoma之保存。

凍存袋，可千萬(wàn)別這么用哈！

1.不要使用金屬管夾

2.不要離心

3.不要在凍存袋上直接寫(xiě)字標(biāo)識(shí)凍存細(xì)胞的信息

4.不要在凍存袋表面粘帖標(biāo)簽不推薦使用同一凍存袋多次凍融細(xì)胞

5.DMSO稀釋以后才能放進(jìn)凍存袋，DMSO濃度不要超過(guò)10%

6.復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)建議把凍存袋放在一個(gè)保護(hù)袋中進(jìn)行融化

7.不要超過(guò)凍存袋推薦的工作體積

凍存采血袋的優(yōu)點(diǎn)

采血袋通過(guò)連接導(dǎo)管與一三通管相連;所述一三通管的三個(gè)孔設(shè)置方向?yàn)閮蓚€(gè)并列相反，CS50凍存袋代理，一個(gè)向下方向，分別連接采血袋;第二三通管和轉(zhuǎn)移袋;所述第二三通管的三個(gè)孔分別連接轉(zhuǎn)移袋，細(xì)胞培養(yǎng)袋和細(xì)胞凍存袋;所述采血袋上設(shè)置有阻塞件，凍存袋代理，所述阻塞件由PVC套管和PC折芯組成;所述采血管;一三通管的主管和支管，第二三通管的主管和支管均設(shè)有止流夾.本實(shí)用新型提供的用于細(xì)胞培養(yǎng)的凍存袋從采血到所需成分冷凍保存一步到位減少了成分污染，保障了成分質(zhì)量要求.

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