




腹0水的純化
采集復(fù)水后,12 000 r/min 離心 15 min,去掉 沉淀等雜質(zhì)。往離心后的腹0水中加入等體積的 PBS,并添加***銨固體至 50% 飽和,靜置 2 h,12 000 r/min離心15 min,fu水制備,棄 上 清,用 PBS 重 新 溶 解 沉 淀,然 后 再次加入***銨固體至 45% 飽和,靜置兩個(gè)小時(shí)左右,12 000 r/min 離心 15 min 棄去上清,用少量 PBS 溶解沉淀,即得到較純的抗0體,對(duì) PBS 透析除去***銨,透析時(shí)間為24 h,透析過程中更換透析液兩至三次。
QuickAntibody抗0體產(chǎn)生快,抗0體滴度高,抗0體親合力高。以標(biāo)準(zhǔn)免0疫程序?yàn)槔瑹o論是用于單克0隆還是多克0隆抗0體制備,只需要在三周內(nèi)進(jìn)行兩針免0疫,通常在第五周即可獲得ELISA滴
度(Cutoff值為0.1000)高達(dá)1:10000-1:10000000的高親合力抗0體水平。
QuickAntibody不***抗原天然構(gòu)象,從而易于篩選獲得針對(duì)構(gòu)象型抗原表位的單克0隆抗0體,這是弗氏佐劑所不具備的一個(gè)重要特點(diǎn)。
QuickAntibody是水溶性佐劑,使用時(shí)不需要弗氏佐劑的復(fù)雜乳化過程,抗原和佐劑只需簡(jiǎn)單混合即可免0疫動(dòng)物。
QuickAntibody使用肌肉免0疫途徑,與常規(guī)小鼠單克0隆抗0體制備過程中使用足墊或脾內(nèi)免0疫相比,極大方便了使用。
在McAb的研制過程中,動(dòng)物免0疫是McAb制備過程中的關(guān)鍵步驟。但是傳統(tǒng)動(dòng)物免0疫方式通常需要二個(gè)月左右,不但耗時(shí)長,而且抗原消耗的量大、對(duì)抗原純度要求高。本實(shí)驗(yàn)試圖通過優(yōu)化傳統(tǒng)免0疫小鼠的方法,大大縮短動(dòng)物免0疫時(shí)間并減少了抗原的消耗量,為進(jìn)一步組裝患者腫0瘤***及血0清中AFP水平檢測(cè)的***盒打下良好的基礎(chǔ),為臨床研究、腫0瘤的診治提供更為有效的工具。

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