




膿毒癥模型
膿毒癥模型方法及原理
一般構建膿毒癥模型有多種方式,例如***攻擊、內(nèi)毒su攻擊、腹膜炎攻擊等,針對小鼠較為經(jīng)典的方法為盲腸jie扎穿刺(CLP)。此方法屬于腹膜炎攻擊方法的一種,主要是通過***方式將小鼠自身盲腸內(nèi)容物釋放到腹腔造成gan染,從而模擬膿毒癥的發(fā)生和發(fā)展。
實驗方法
Step1:常規(guī)方法ma醉小鼠,剔除腹部毛發(fā),酒精消毒
Step2:腹部正中開口,逐層打開皮膚和腹膜,暴露盲腸
Step3:使用銳器刺穿盲腸尾部1/2位置,擠出內(nèi)容物
Step4:放置引流物,時盲腸內(nèi)容物可持續(xù)流出
Step5:逐層縫合皮膚,***實驗外包,碘伏消毒,將小鼠放回籠內(nèi)飼養(yǎng)
實驗動物的采集方法
1. 大鼠、小鼠的采集:用***脫臼法處死動物,剝離出胸骨或股骨,用吸取少量的Hank平衡鹽溶液,沖洗出胸骨或股骨中全部液。如果是取少量的作檢查,可將胸骨或股骨剪斷,將其斷面的擠在有稀釋液的玻片上,混勻后涂片涼干即可染色檢查。
2. 大動物的采集:狗等大動物的采集可采取穿刺方法。 先將動物、固定、局部除毛、消毒皮膚,然后估計好皮膚到的距離,把穿刺針的長度固定好。操作人員用左手把穿刺點周圍的皮膚繃緊,右手將穿刺針在穿刺點垂直刺入,穿入固定后,輕輕左右旋轉將穿刺針鉆入,當穿刺針進入腔時常有落空感。狗的采集,一般采用髂骨穿刺。
狗等大動物常用的穿刺點:胸骨:穿刺部位是胸骨體與胸骨柄連接處。肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各點的中點。脛骨:穿刺部位是股骨內(nèi)側、靠下端的凹面處。如果穿刺采用的是肋骨,穿刺結束后要用膠布封貼穿刺孔,防止發(fā)生。

實驗動物的選擇在此,***實驗外包費用,提幾點原則和方法。
第①,做什么樣的實驗?什么動物適合本實驗?做什么實驗,這是選題時就確定好了的??隙ㄊ墙?jīng)過論證的。無需多講。用什么樣的動物呢?我想,大多是參照文獻,再結合自己對實驗動物的了解。選題之時就肯定閱讀過很多文獻了,因此不會陌生。
如:做高、動脈粥樣硬化,我想大多數(shù)人會選擇大鼠、兔子,也可以選金黃地鼠、鵪鶉,少數(shù)人會選小鼠,但我想用狗和猴的基本上不會有吧。因為要選擇比較容易形成此***的動物,且要易得。
所以,對于不太熟悉的人來說,要多看文獻,參考別人是如何選擇的。就算是對動物比較了解,系統(tǒng)學過這方面知識的,也要多看文獻,綜合權衡。切忌隨意地憑空想像。
第二,***實驗外包哪家好,采取什么樣的方法造模?做動物實驗通常是要造模的。選擇什么樣的方式?這要從實驗的目的及條件入手。造,可以用***,也可以用。其中有四氧及鏈脲佐菌素(STZ)。后者用得較多,且為國際認同。
而四氧目前用得較少了。造模方法一是參照《藥理實驗方法學》,二是參照文獻。造模方法有時也決定了你的動物選擇。像做***造動脈粥樣硬化,我想用大鼠比小鼠來得方便吧?
第三,經(jīng)費承受能力如何?做實驗也要精打細算。不可能為了所謂的高水平、技術而不顧實驗室的條件。像做高脂動物模型,假設經(jīng)費只有一萬多元,一定要弄個敲除APoE***的小鼠來做,恐怕沒人認同。做一個簡單的鎮(zhèn)痛實驗,陜西***實驗,你非得要用SPF實驗室,這也是不太實際的,也是沒必要的。

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