使用廣泛的氨基和羧基偶聯(lián)劑就要數(shù)EDC和NHS(Sulfo-NHS)了。大多數(shù)情況下,同時(shí)使用EDC/NHS的交聯(lián)于只使用EDC的,替代肖特玻片公司,NHS的使用能夠極大增強(qiáng)偶聯(lián)效率。但也有個(gè)例,比如2012年的一篇工作(Diagnostics (Basel). 2012 Aug 27;2(3):23-33.),他們?cè)贏PETS修飾的金芯片和96孔板表面組裝一抗,發(fā)現(xiàn)單獨(dú)使用EDC比同時(shí)使用EDC/NHS和EDC/Sulfo-NHS都。





物理吸附是簡(jiǎn)單的***固定化方法,包括靜電作用、疏水作用、極性相互作用等非共價(jià)鍵作用。優(yōu)點(diǎn)顯而易見—省時(shí)省力省錢,缺點(diǎn)也是不可避免—(1)***偶聯(lián)的取向(orientation)不可控,什么是替代肖特玻片,完全由概率來確定;(2)物理吸附作用力弱,上海替代肖特玻片,應(yīng)用時(shí)有***脫離現(xiàn)象。學(xué)中,經(jīng)常用到物理吸附的地方就是一抗的負(fù)載過程。比如在ELISA板(聚)和側(cè)流試紙條(纖維素膜)等表面負(fù)載***的時(shí)候,用到的就是物理吸附作用。
盡管如此,通常原位合成方法仍然比較復(fù)雜,除了在***芯片研究方面享有盛譽(yù)的 Affymetrix 等公司使用該技術(shù)合成探針外,其它中小型公司大多使用合成點(diǎn)樣法。后一方法在多聚物的設(shè)計(jì)方面與前者相似,合成工作用傳統(tǒng)的 DNA 或多肽固相合成儀以完成,只是合成后用特殊的自動(dòng)化微量點(diǎn)樣裝置將其以比較高的密度涂布于纖維膜、尼龍膜或玻片上。支持物應(yīng)事***行特定處理,例如包被以帶正電荷的多聚賴酸或氨基***。現(xiàn)在已有比較成型的點(diǎn)樣裝置出售,如美國(guó) Biodot 公司的點(diǎn)膜產(chǎn)品以及 Cartesian Technologies 公司的 PixSys NQ/PA 系列產(chǎn)品。前者產(chǎn)生的點(diǎn)陣密度可以達(dá)到 400/cm2 ,后者則可達(dá)到 2500/cm2 。
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