




實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)記
1. 染色法 適用于小動(dòng)物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是將化學(xué)***涂在動(dòng)物的被毛上,以不同顏色來(lái)區(qū)分動(dòng)物。常用的化學(xué)***有:3%~5%溶液(***)、0.5%中性品紅(紅色)、2%(咖啡色)。
標(biāo)記的原則是:先左后右,從上到下。如果動(dòng)物編號(hào)是二位數(shù)或三位數(shù),那相應(yīng)的用二種或三種不同的顏色,不同顏色代表不同位數(shù)(個(gè)位、十位、百位),標(biāo)記的原則同上。
2. 掛牌法 常用于大動(dòng)物。寫(xiě)有編號(hào)的金屬牌掛在動(dòng)物的頸上來(lái)區(qū)分動(dòng)物。對(duì)于猴、狗、貓等動(dòng)物有時(shí)可不做標(biāo)記,只記錄它們的外表特征和毛色即可。
3. 籠子編號(hào) 標(biāo)記在籠子上。
以上只介紹了幾種的方法,在使用中可靈活掌握。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各種體液、的采集方法
消化液的采集
(一) 唾液
1. 直接抽取法 在急性實(shí)驗(yàn)中, 可用吸管直接插入動(dòng)物口腔或唾液腺導(dǎo)管抽吸唾液,此法非常簡(jiǎn)單,但從口腔抽吸唾液會(huì)有雜質(zhì)混入。
2. 制造腮腺瘺法 在慢性實(shí)驗(yàn)中,收集狗的唾液,要用***方法將腮腺導(dǎo)管開(kāi)口移向體外,即以腮腺導(dǎo)管為中心,切成一直徑約2~3cm的圓形粘膜片,將此粘膜片,與周?chē)?**分開(kāi),天津動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包,穿過(guò)皮膚切口引到頰外,將帶有導(dǎo)管開(kāi)口的粘膜片與周?chē)钠つw縫合,腮腺分泌的唾液就流出頰外。這種方法可以收集到較純凈的唾液。
(二)胃液
1. 直接收集胃液法 急性實(shí)驗(yàn)時(shí),先將動(dòng)物,將插胃管經(jīng)口插入胃內(nèi),在灌胃管的出口連一,用此可收集到胃液,此法適用于狗等大型動(dòng)物。如是大鼠,需***剖腹,從幽門(mén)端向胃內(nèi)插入一塑料管,再由口腔經(jīng)食道將一塑料管插入前胃,用pH7.5、35℃左右的生理鹽水,以12ml/h的流速灌胃,收集流出液,進(jìn)行分析。
2. 制備胃瘺法 在慢性實(shí)驗(yàn)中,收集胃液多用胃瘺法,如全胃瘺法、巴氏小胃瘺法、海氏小胃瘺法等。制備小胃是將動(dòng)物的胃分離出一小部分,縫合起來(lái)形成小胃,主胃與小胃互不相通,主胃進(jìn)行正常消化,從小胃可收集到純凈的胃液。應(yīng)用該法,可以待動(dòng)物***健康后,在動(dòng)物清醒狀態(tài)下反復(fù)采集胃液。
(三)胰液和膽汁
在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,主要是通過(guò)對(duì)胰總管和膽總管的插管而獲得胰液或膽汁。狗的胰總管開(kāi)口于十二指腸降部,在緊靠腸壁處切開(kāi)胰管,結(jié)扎固定并與導(dǎo)管相連,即可見(jiàn)無(wú)色的胰液流入導(dǎo)管。大鼠的胰管與膽管匯集于一個(gè)總管,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)課題外包公司,在其入腸處插管固定,并在近肝門(mén)處結(jié)扎和另行插管,可分別收集到胰液和膽汁。
有時(shí)也可通過(guò)制備胰瘺和膽囊瘺來(lái)獲得胰液和膽汁。
營(yíng)養(yǎng)不良性gan硬化動(dòng)物模型
(1)fu制方法 離乳雄性大鼠,每日喂食缺乏dan堿的低蛋白高脂肪飼料8~10g,連續(xù)2~3個(gè)月。該飼料用酪蛋白或大豆作為蛋白來(lái)源,另加蔗糖、豬油、***粉、鹽和定量的L-胱酸而組成。造模過(guò)程中,每日觀察動(dòng)物的一般活動(dòng)狀況,每周稱(chēng)量動(dòng)物體重,造模結(jié)束后抽取全血制備xue清、稱(chēng)取部分肝***制備勻漿作生化檢測(cè),摘取一些qi官稱(chēng)重,換算成臟器系數(shù),并對(duì)肝***進(jìn)行***形態(tài)學(xué)檢查。
(2)模型特點(diǎn) 造模1個(gè)月時(shí),約有20%動(dòng)物si亡,2個(gè)月時(shí),動(dòng)物體重增長(zhǎng)停止,小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)***外包,有fu水潴留、出血、脫毛等現(xiàn)象出現(xiàn),巨檢可見(jiàn)典型的肝結(jié)節(jié)、脾腫大、腹shui潴留、yi腺腫大、gao丸萎縮等特有癥狀,有的還出現(xiàn)shen硬化,光鏡檢查顯示,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)課題外包選哪家,造模初期,肝***呈小結(jié)節(jié)性脂肪gan硬化,隨著飼育時(shí)闖的延長(zhǎng),出現(xiàn)粗大的結(jié)節(jié)性或小葉性gan硬化。
(3)比較*** 膳食不平衡或特種營(yíng)養(yǎng)素缺乏可以導(dǎo)致動(dòng)物肝細(xì)胞病變。實(shí)驗(yàn)證明,長(zhǎng)期喂食dan堿缺乏食物可誘發(fā)大鼠肝脂變、肝纖維化乃至gan硬化。本模型采用離乳大鼠是由于幼鼠在發(fā)育期階段對(duì)dan堿的需求量較大,因dan堿缺乏造成對(duì)機(jī)體傷害的敏***自然比成年動(dòng)物更強(qiáng)。但事實(shí)上,對(duì)dan堿缺乏的敏***取決于體內(nèi)dan堿氧化酶的含量。人類(lèi)gan臟不含dan堿氧化酶,不存在dan堿缺乏問(wèn)題,所以此模型不適于在發(fā)病機(jī)制上進(jìn)行人類(lèi)相關(guān)***的研究。不過(guò),該模型由于fu制周期長(zhǎng),飼料配制復(fù)雜,花費(fèi)大,現(xiàn)已少見(jiàn)有單用此方法造模者。此外,實(shí)驗(yàn)中使用雄性動(dòng)物雄鼠是因?yàn)樾坌詣?dòng)物在向gan硬化轉(zhuǎn)化過(guò)程中比雌性動(dòng)物更為均一。在飼料中混入微量的半胱氨酸具有促進(jìn)gan硬化發(fā)展的作用。
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