既要充分保留被測核酸，（特別是RNA）不被降解，又要盡可能維持原有***或細胞的形態(tài)結構。

步驟：基本與免1疫***化學技術相似，即***要求新鮮和迅速投入固定液。固定液為4%多聚甲醛/0.1 M PBS（PH7.0-7.6），含有1/1000 DEPC。標本較大時用刀片切成厚度不超過4mm的小塊，固定1小時即可，較大的標本固定不要超過2小時。某些***對過度固定尤其敏感，如動物大腦，固定時間30-40分鐘，一般不要超過1小時。取材過程中避免手指、唾液和未經(jīng)RNA酶***處理的器具接觸標本。冷凍切片以厚5~30um佳，40℃烤箱內(nèi)干燥2小時后儲存在-80℃超低溫冰箱，在-20℃可保存２～３周，在-70℃可保存數(shù)月之久。

原位雜交

實驗原理

原位雜交技術（in situhybridization）是以標記的核酸分子為探針，在***細胞原位檢測特異核酸分子的技術。

使含有特異序列、經(jīng)過標記的核酸單鏈即探針，植物染色體原位雜交測試服務，在適宜條件下與***細胞中的互補核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交，再以自顯影或細胞化學方法對標記探針進行探測，從而在細胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。

1、***取材：***取材應盡可能新鮮。由于***RNA降解較快，所以新鮮***和培養(yǎng)細胞在30 min 內(nèi)固定。

       2、細胞***固定目的與注意事項：

       （1）保持細胞結構；

       （2）大限度地保持細胞內(nèi)DNA或RNA的水平；

       （3）使探針易于進入細胞或***。

        常用的固定劑是多聚甲醛，與其它醛類固定劑不同，多聚甲醛不會與蛋白質產(chǎn)生廣泛的交叉連接，因而不會影響探針穿透入細胞或***。