石蠟切片制作流程1.取材：取材必須新鮮，切取材料時(shí)刀要銳利避免擠壓***，一般厚度不超過(guò)2mm，大小不超過(guò)5×5mm2，取后立即投入固定液。

2.固定：固定劑為***塊體積的10～15倍，一般為4%的中性多聚甲醛，固定時(shí)長(zhǎng)24小時(shí)。

3.脫水：70%酒精→85%酒精→90%酒精→95%酒精→無(wú)水乙醇Ⅰ→無(wú)水乙醇Ⅱ（不同***脫水時(shí)間不同）

4.透明：透明劑能同時(shí)與脫水劑和石蠟混合，它取代了脫水劑后，石蠟便能順利地滲入***

石蠟包埋切片實(shí)驗(yàn)基本步驟主要有以下幾步：

1、取材：新鮮***固定于4%多聚甲醛24h以上。將***從固定液取出在通風(fēng)櫥內(nèi)用***刀將目的部位***修平整，將修切好的***和對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽放于脫水盒內(nèi)。

2、脫水：將脫水盒放進(jìn)吊籃里于脫水機(jī)內(nèi)依次梯度酒精進(jìn)行脫水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-無(wú)水乙醇I 30min-無(wú)水乙醇II 30min-醇苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蠟I1h-蠟II1h-蠟III 1h。

3、包埋：將浸好蠟的***于包埋機(jī)內(nèi)進(jìn)行包埋。先將融化的蠟放入包埋框，待蠟?zāi)讨皩?**從脫水盒內(nèi)取出按照包埋面的要求放入包埋框并貼上對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽。于-20°凍臺(tái)冷卻，蠟?zāi)毯髮⑾瀴K從包埋框中取出并修整蠟塊。

4、切片：將修整好的蠟塊置于石蠟切片機(jī)上切片，片厚4μm。切片漂浮于攤片機(jī)40℃溫水上將***展平，用載玻片將***撈起，病理切片技術(shù)服務(wù)，并放進(jìn)60℃烘箱內(nèi)烤片。待水烤干蠟烤化后取出常溫保存?zhèn)溆谩?/p>



切片經(jīng)HE染色后，要脫水透明，才能用中性樹膠封蓋。he染色對(duì)于貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后，取出細(xì)胞爬片，用PBS 洗滌3次。著況與***或細(xì)胞的種類有關(guān)。切片在蘇mu素染液中停留過(guò)長(zhǎng)；或切片太厚；或分化時(shí)間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(佳厚度1-2層細(xì)胞核)，要么重新染色，要么重新制片。染色的終結(jié)果是：細(xì)胞核呈藍(lán)色、胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一樣的紅色，病理技術(shù)服務(wù)提醒：在進(jìn)行HE染色需要染色時(shí)間，脫水，染色時(shí)間不一樣，需要等 ，明確HE評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。



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