





適用場景
1、高靈敏度地檢測蛋白-蛋白的交互作用;
2、尋找在蛋白-蛋白交互作用中起關鍵作用的結構域或活性位點;
3、尋找與靶蛋白相互作用的新蛋白;
4、尋找具有藥1物治1療作用的小分子多肽;
5、尋找調(diào)控蛋白質(zhì)相互作用的化合物;
6、繪制蛋白質(zhì)相互作用圖譜。
酵母雙雜交技術的優(yōu)點
1、無需純化蛋白;
2、檢測在活1細胞內(nèi)進行,可以在一定程度上代表體內(nèi)的真實情況;
3、檢測的結果是***表達產(chǎn)物的積累效應,因而可檢測存在于蛋白質(zhì)之間的微弱的或暫時的相互作用;
4、酵母雙雜交系統(tǒng)可采用不同***、器1官、細胞類型和分化時期材料構建cDNA文庫,并能分析細胞質(zhì)、細胞核等多種亞細胞部位的蛋白。

原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或***中的核酸進行雜交,稱為原位雜交,使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在***或其他真核細胞中的位置。
原位雜交技術的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列,植物***RNA原位雜交技術服務,將有放1射性或非放1射性的外源核酸(即探針)與***、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結合成專一的核酸雜交分子,經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在***、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件:***、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物
目前,我國已穩(wěn)定開展的分子病理技術主要有顯色原位雜交、熒光原位雜交、PCR、熒光定量PCR、***芯片和DNA測序技術。顯色原位雜交(chromogenicinsituhybridization,CISH)技術是分子生物學、***化學及細胞學相結合產(chǎn)生的一門新興技術,是利用核酸分子單鏈間堿基互補的原理,將地1高辛或生物素標記的外源核酸探針與***、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結合成雙鏈雜交分子,通過過氧化物酶或堿性磷酸酶的呈色反應將待測核酸在***、細胞或染色體上的位置顯示出來。根據(jù)探針種類不同可分為DNA原位雜交和RNA原位雜交。

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