





水稻種子是人類重要的食物來源,其發(fā)育涉及一個(gè)復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),其中轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮了關(guān)鍵作用。MADS轉(zhuǎn)錄因子家族成員是植物花器1官發(fā)育的重要調(diào)控因子,已有的研究表明,幾乎所有的水稻MADS***都在種子中表達(dá),但對(duì)MADS家族成員參與水稻種子發(fā)育調(diào)控的研究結(jié)果仍比較少。
在這項(xiàng)研究中,研究組基于前期的表達(dá)譜研究基礎(chǔ),分析得到了一個(gè)在水稻生殖發(fā)育階段優(yōu)先表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子MADS29。細(xì)致分析表明,MADS29在花藥、胚珠和種子中均表達(dá),且在受精后的母體***表達(dá)量高。MADS29的反義轉(zhuǎn)1***植株呈現(xiàn)種子皺縮、淀粉粒形態(tài)異常、灌漿速率下降等表型。通過解剖學(xué)切片、末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記實(shí)驗(yàn)和全***組表達(dá)譜芯片分析等,研究人員證明了MADS29通過調(diào)控程序化死1亡(PCD)過程促進(jìn)珠心細(xì)胞和珠心突起處的降解。進(jìn)一步的體外凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)顯示,MADS29能夠通過直接結(jié)合程序化死1亡相關(guān)***的啟動(dòng)子區(qū)域而調(diào)控其表達(dá),進(jìn)而影響胚乳發(fā)育。

原位雜交(in situ hybridization)將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或***中的核酸進(jìn)行雜交,稱為原位雜交。使用DNA或者RNA探針來檢測(cè)與其互補(bǔ)的另一條鏈在***或其他真核細(xì)胞中的位置。RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交***化學(xué)或RNA原位雜交。該技術(shù)是指運(yùn)用cRNA或寡核苷酸等探針檢測(cè)細(xì)胞和***內(nèi)RNA表達(dá)的一種原位雜交技術(shù)。其基本原理是:在細(xì)胞或***結(jié)構(gòu)保持不變的條件下,用標(biāo)記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中堿基配對(duì)原則,分子病理技術(shù)服務(wù),與待測(cè)細(xì)胞或***中相應(yīng)的***片段相結(jié)合(雜交),所形成的雜交體 (Hybrids)經(jīng)顯色反應(yīng)后在光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術(shù) 經(jīng)不斷改進(jìn),其應(yīng)用的領(lǐng)域已遠(yuǎn)超出DNA原位雜交技術(shù)。尤其在***分析和診斷方面能作定性、***和定量分析,已 成為有效的分子病理學(xué)技術(shù),同時(shí)在分析低豐度和罕見的mRNA表達(dá)方面已展示了分子生物學(xué)的一重要方向。

結(jié)1核病是嚴(yán)重威脅人類健康的傳1染性***,每年約有200萬人死于該病,其死1亡率在傳1染性***中僅低于艾1滋病,隨著醫(yī)1療診斷技術(shù)的迅猛發(fā)展,結(jié)1核病病理診斷經(jīng)歷了單一形態(tài)學(xué)和聯(lián)合特殊染色,到如今利用分子病理***檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確診斷的三個(gè)階段。
我科早在全1國(guó)建立了系統(tǒng)性結(jié)1核病分子病理診斷技術(shù)的平臺(tái),率1先將分子病理診斷技術(shù)在結(jié)1核病中應(yīng)用并推廣,解決了傳統(tǒng)病理對(duì)菌陰肺結(jié)1核及肺外結(jié)1核病的診斷率低、結(jié)1核病與非結(jié)1核分枝桿1菌病無法鑒別以及耐藥結(jié)1核病無法診斷等難題。同時(shí),我科作為中華***會(huì)結(jié)1核病學(xué)分會(huì)金1牌病理培訓(xùn)基地,負(fù)責(zé)***制定了結(jié)1核病病理診斷規(guī)范、培訓(xùn)了大量的專1業(yè)技術(shù)人員,為形成結(jié)1核病病理學(xué)綜合診治新模式做出了卓1越貢獻(xiàn)!

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